亚洲av永久无码精品天堂d2,人妻精品久久无码专区精东影业,天天躁日日躁aaaaxxxx,亚洲熟妇av一区

咨詢熱線

18019981829

當(dāng)前位置:首頁(yè)   >  產(chǎn)品中心  >  Abnbio感受態(tài)細(xì)胞  >  酵母 感受態(tài)細(xì)胞  >  Y2HGoldChemically 酵母感受態(tài)細(xì)胞

Chemically 酵母感受態(tài)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:Y2HGold Chemically Competent Cell/Chemically 酵母感受態(tài)細(xì)胞
保存條件:-80℃

  • 產(chǎn)品型號(hào):Y2HGold
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時(shí)間:2024-03-27
  • 訪  問(wèn)  量:375

詳細(xì)介紹

品牌Abnbio貨號(hào)ABG701-50
規(guī)格50支100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥

Y2HGold Chemically Competent Cell  酵母感受態(tài)細(xì)胞

基因型:

=MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ,gal80Δ,LYS2 : : GAL1UAS–Gal1TATA–His3,GAL2UAS–Gal2TATA–Ade2 URA3 : : MEL1UAS–Mel1TATA AUR1-C MEL1

簡(jiǎn)要說(shuō)明:

Y2HGold菌株是GAL4系統(tǒng)酵母雙雜實(shí)驗(yàn)用菌株,MATa型,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?;蚺cMATα型酵母菌株Y187通過(guò)mating操作進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫(kù)試驗(yàn)。Y2HGold有四個(gè)報(bào)告基因:AbAr,HIS3,ADE2,MEL1,分別由三種不同的啟動(dòng)子 (G1,G2,M1)啟動(dòng),這三種啟動(dòng)子只有GAL4識(shí)別的17 bp核心區(qū)相同,其余部分均不同,大大降低了酵母雙雜假陽(yáng)性發(fā)生的概率。此外新報(bào)告基因AbAr與以前的營(yíng)養(yǎng)缺陷報(bào)告基因相比具有更低背景的優(yōu)點(diǎn),也可以降低酵母雙雜假陽(yáng)性發(fā)生的概率。Y2HGold感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pGADT7質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>104cfu/μg DNA。

操作說(shuō)明:

1. 取pBait-AbAi質(zhì)粒5µg,BstBI或 BbsI酶切1h,回收;

2. 取一支無(wú)菌的1.5ml EP管,依次加入預(yù)冷的預(yù)冷的線性pBait-AbAi質(zhì)粒1-5 µg(體積不高于15 µl),Carrier DNA(95-100 度5min 快速冰浴,重復(fù)一次)10µl,100µl冰上融化的Y1HGold感受態(tài)細(xì)胞,PEG/LiAc 500µl,輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;

3. 30℃水浴30min,每10min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;

4. 每支加入20µl的二甲基亞砜(用以提高轉(zhuǎn)化效率,可不做);

5. 42℃水浴15min,每5min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;

6. 12000rpm瞬時(shí)離心棄上清,每支加入1ml的YPD Plus(YPDA)于30℃復(fù)蘇1h(用以提高轉(zhuǎn)化效率,可不做);

7. 12000rpm瞬時(shí)離心棄上清,用100µl 0.9% NaCl重懸,涂板,30℃培養(yǎng)48-96h。

注意事項(xiàng):

1.PEG在低溫下易析出,請(qǐng)?jiān)诔叵聎an全溶解后使用。

2.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量。

3.同時(shí)轉(zhuǎn)化2-3種質(zhì)粒時(shí)可增加質(zhì)粒的用量。

4.Y1HGold酵母菌株對(duì)高溫敏感,最適生長(zhǎng)溫度為27-30℃;高于31℃,生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率呈指數(shù)下降。

5.菌落變粉不是污染,是酵母細(xì)胞生長(zhǎng)中一個(gè)常見(jiàn)現(xiàn)象。當(dāng)細(xì)胞在平板培養(yǎng)幾天后,平板上的Adenine被酵母消耗完畢,酵母試圖通過(guò)自身代謝途徑合成Adenine以供利用,然而,Y1HGold的ADE2基因被破壞,Adenine合成途徑受阻;又由于其ADE4,5,6,7,8基因均正常,所以造成中間產(chǎn)物P-ribosylaminoimidazole(AIR)在細(xì)胞中積累而使菌落變?yōu)榉奂t色。

6.酵母在缺陷培養(yǎng)基中生長(zhǎng)速度比YPDA培養(yǎng)基慢,培養(yǎng)基中缺陷成分越多,生長(zhǎng)越慢,以轉(zhuǎn)化涂板為例:涂YPDA平板29℃,48h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克隆;涂SD單缺平板29℃,48-60h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克隆,涂SD雙缺平板29℃,60-80h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克隆,涂SD三缺或四缺平板平板29℃,80-90h培養(yǎng)可見(jiàn)直徑1mm克隆。




產(chǎn)品咨詢

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細(xì)地址:

  • 補(bǔ)充說(shuō)明:

  • 驗(yàn)證碼:

    請(qǐng)輸入計(jì)算結(jié)果(填寫(xiě)阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7

聯(lián)系我們

合肥恩派爾貿(mào)易有限公司 公司地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路624號(hào)桑夏精英時(shí)代廣場(chǎng)507室   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)
  • 聯(lián)系人:李女士
  • QQ:3644884546
  • 公司傳真:4009005473
  • 郵箱:sale@abnbio.com

掃一掃 更多精彩

公眾號(hào)

小程序

夜夜爽日日澡人人添| 下面流水痒好想要男人| 久久免费看黄a级毛片| 老首长玩小处雏苞| 宿舍玩弄六个女同学小说| 四虎成人精品无码永久在线| 精品无人区无码乱码av片国产| 国产永久免费裸体美女视频| 亚洲av无一区二区三区久久\ | 高潮a片www张柏芝陈冠希| 麻豆传媒官网入口| 国产艳妇av在线观看果冻传媒| 久久99精品国产自在现线小黄鸭| 人人妻人人澡人人爽人人dvd | 天天爽夜夜爽人人爽| 掀起少妇的裙子挺进去短篇小说| 国产精品久久久久久一区二区三区 | 亚洲色偷精品一区二区三区 | 高h喷水荡肉爽文np肉色学校| 国产精品天干天干在线观看澳门 | 男人和女人接吻视频| 一起洗澡的老师免费播放| 日韩a片无码毛片免费看小说| 无码人妻一区二区三区AV| 精品国产v无码大片在线观看 | 久久国产avjust麻豆| 粉嫩AV久久一区二区三区| 亚洲精品亚洲人成人网| 亚洲小鲜肉与欧美猛男的区别| 成人色情视频免费观看| 极品美女扒开粉嫩小泬| 少妇饥渴偷公乱A级无码| 国产三级精品三级在线专区| 熟睡人妻被讨厌的公侵犯| 国产亚洲av片在线观看18女人| 国产成人精品久久| 国产精品扒开腿做爽爽爽A片小说| 拍国产真实伦偷精品| 久久久精品人妻一区二区三区| 翘臀嫩美少年被调教爽到失禁| 半夜洗澡被老头添一夜|